北虫草菌种(北虫草液体菌种制作方法)

各位老铁们好，相信很多人对北虫草菌种都不是特别的了解，因此呢，今天就来为大家分享下关于北虫草菌种以及北虫草液体菌种制作方法的问题知识，还望可以帮助大家，解决大家的一些困惑，下面一起来看看吧！

北虫草液体菌种制作方法

配方：玉米粉1%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母粉0.5%、磷酸二氢钾0.1%、水95.35%、硫酸镁0.05%、维生素B110mg、PH值调至6.5左右。

1.制作一级摇瓶种：将这些原料溶于水后装在500毫升三角瓶中，每个三角瓶装量200毫升，放入玻璃珠3粒左右，塞紧棉塞，然后用4层纱布罩住棉塞、瓶口扎紧，放在高压灭菌锅内进行消毒，待压力表上升至0.5kg/cm2压力时，即放净冷气待指针降至0后，再关掉放气阀门，待温度表指针逐渐上升至1.1kg/cm2后就开始保温30分钟后，慢慢下降指针至0，然后开盖冷却至常温，再移入接种箱或超净工作台等待接种。

2.接种方法：先把灭菌后的北虫草液体菌种培养基移放在超净工作台上，并把北虫草母种和接种勾、酒精灯、酒精棉球等接种物品也放在超净工作台上，工作服挂在接种室消毒。然后在接种室点燃烟雾剂（用臭氧消毒器更好），立即关闭所有门窗密闭消毒同时打开紫外线灯。待40min后，将烟雾放净，关闭紫外线灯，接种人员就可进行接种。接种的方法是穿好工作服，打开超净工作台风机，点燃酒精灯，左手拿着母种试管对准火焰口，右手拿着铁勾在酒精灯火焰消毒3-5秒种后立即伸进母种试管内把菌种分成5-7段，再用左手迅速将纱布瓶盖打开，右手立即把一段菌块勾入瓶内（每瓶接入5-6片0.5平方厘米大小菌种）速将瓶盖按原样盖紧。

当北虫草菌种接好后，移入22-24℃恒温培养室，摇床震荡发菌培养。摇床转速140r/min，经过4-6天的发菌培养，经检查北虫草菌液的颜色开始清亮、菌球密集，瓶口闻有很浓的北虫草气味，可判断为菌种优良。如发现发菌瓶内浓度低、气味臭，并有五颜六色的菌液，就是有杂菌污染，坚决不能用。

3.制作二级摇瓶：培养基同一级，用5000ml三角瓶装量2000ml北虫草液体菌种，灭菌冷却后把一级摇瓶种按10%无菌操作接入大摇瓶，22-24℃，140r/min震荡培养72小时后，菌球大小均匀、密度80%以上，菌液清亮，气味清香、无污染的即为合格菌种。由于5000ml大摇瓶体积较大，用手提高压锅放不下，用大锅又太浪费，为解决大摇瓶灭菌问题，花山食用菌研究所研制了一款100升立式电加热自控高压灭菌锅，一次可灭4个5000的大摇瓶，同时，研制了一次可摇5-7瓶5000ml大三角瓶的摇床，轻便、无噪音、耗能低。

4.菌种稀释：发好的虫草液体菌种接种前需要稀释以扩大接种规模。稀释倍数依据接种的盘数按5-8倍稀释。用稀释罐稀释时，按液体罐空消、实消操作规程：

发酵罐空消（内胆、过滤器、管线的消毒）是对发酵罐进行设备消毒灭菌的过程，对于放置一周不用的发酵罐或者是因为停电使空压机（打气泵）停止运转的发酵罐都需要进行发酵罐的空消操作，具体的操作方法：

（1）关闭发酵罐，除夹套排气门外的所有阀门，拧紧发酵罐罐口盖子。（2）启动电源，打开控制柜“灭菌”键，此时进入灭菌状态。

（3）当温度升到100℃夹套有蒸汽冒出时关闭夹套排气阀门，此时给夹套升温升压，当夹套压力达到0.05Mpa以上时，缓慢打开夹套进过滤器阀门，打开过滤器尾阀门。

（4）当过滤器冷凝水排放完毕有蒸汽冒出后微开过滤器尾阀门，缓慢打开进气阀门尾阀门，排放空气管道内的冷凝水，冷凝水排放完毕后缓慢打开进气阀门，使得蒸汽慢慢进入罐体。

（5）微开发酵罐排气气阀门，缓慢将发酵罐内的冷空气排放出去，在空消的整个过程中，控制发酵罐排气阀门，使得发酵罐排气阀门有少量蒸汽流通。

（6）当控制柜温度显示接近123℃，发酵罐罐内压力接近0.12Mpa时缓慢打开接种管道尾端，将接种管道内冷凝水排放完毕后，保证尾端有少量蒸汽冒出保证蒸汽流通。

（7）当温度达到123℃，发酵罐压力达到0.12Mpa时控制柜开始时间倒计时，屏幕上显示温度和倒计时时间，当倒计时时间为0时，控制柜自动报警，此时空消结束。

（8）空消结束后，关闭发酵罐加热棒，关闭夹套进过滤器阀门、发酵罐进气阀门、发酵罐接种阀门、接种管道尾端阀门。微开发酵罐排气阀门、夹套排气阀门、发酵罐进气阀门尾阀门、使得夹套和发酵罐的压力慢慢下降，当过滤器压力即将卸完时，打开空压机（打气泵），使得空气流通过滤器，通过过滤器的空气在发酵罐进气阀门尾阀门排放掉，流过过滤器的空气对滤芯吹30min，使得吹出的空气无水分后备用。

（1）定量加入清水后，打开夹套排气阀门和发酵罐排气阀门，启动电源，按下“灭菌”键，此时进入灭菌状态。

（2）当温度升到100℃夹套有蒸汽冒出时关闭夹套排气阀门，发酵罐排气阀门微开，整个发酵罐实消过程中控制发酵罐排气阀门的开度，保证发酵罐罐内冷空气排净并保证有蒸汽流通。

（3）当控制柜显示屏幕上显示温度123℃，压力表压力0.12Mpa时控制柜自动倒计时，屏幕上可显示发酵罐温度和倒计时时间，当时间倒计时为0时，控制柜自动报警，打开夹套排气阀门，发酵罐排气阀门，使得夹套和发酵罐压力缓慢下降（发酵罐压力不能掉零）此时发酵罐灭菌结束。

注意：计时开始时和灭菌即将结束时需要对发酵罐进行排水操作，微开接种阀门，有少量气、水排出即可，每次排水时间3-5min。排水的目的一是排出阀门处的生水；二是对阀门管路进行灭菌。

定量加入清水123℃灭菌40分钟，冷却至20度，使用空压机保持正压，无菌操作方法倒入摇瓶种，无菌空气搅拌均匀，罐内升压至0.5mpa接种（接种与液体接种操作相同），接种量50-60ml。接种后18-21℃避光培养，好的菌种7-10天封满料面。

（4）相关设备：为实现北虫草的工厂化周年生产，淄博花山食用菌研究所研制了整套工厂化生产工艺流程及配套设备，择其主要简要介绍：

①红外线定位定量自动装盘机，自动定量加料加水传送，节约人工、效率高；

②5-50立方高压灭菌柜，煤、电、柴，自烧等各种型号；

③100级无菌净化接种线，保障了接种高成功率；

④不锈钢电加热自控液体菌种发酵罐，既可作稀释罐也可发酵培养。（摘自山东淄博花山食用菌研究所）

关于北虫草菌种，北虫草液体菌种制作方法的介绍到此结束，希望对大家有所帮助。